PeproTech高品質(zhì)細(xì)胞因子及蛋白生產(chǎn)商-相關(guān)技術(shù)文章

更新時(shí)間：2024-07-26

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PeproTech高品質(zhì)細(xì)胞因子及蛋白生產(chǎn)商

Peporech公司于1988年創(chuàng)立于美國新新澤西州，經(jīng)過26年的發(fā)展已成為世jie上zui大的重組細(xì)胞因子和蛋白、相關(guān)抗體及ELISA試劑盒。

Peporech公司是高品質(zhì)細(xì)胞因子生產(chǎn)商，產(chǎn)品包括原核和真核細(xì)胞表達(dá)的高質(zhì)量的重組蛋白，單克隆/多克隆抗體，酶聯(lián)免疫吸附開發(fā)試劑盒，相關(guān)培養(yǎng)基等

Peporech公司已經(jīng)開發(fā)出2000多種產(chǎn)品，其精良的技術(shù)保證了產(chǎn)品的高質(zhì)量，可靠性和穩(wěn)定性。

Peporech產(chǎn)品具有很高的性價(jià)比，在世界上眾多高水平的實(shí)驗(yàn)室和研究機(jī)構(gòu)中廣泛使用。截至2013年底，已被13000篇SCT文獻(xiàn)使用。

Peporech產(chǎn)品主要領(lǐng)域：

l 重組細(xì)胞因子和蛋白

l 單克隆和多克隆抗體

l ELISA試劑盒

l 無動(dòng)物成分（Animal Free）的重組細(xì)胞因子和蛋白

l GMP級(jí)別的重組細(xì)胞因子和蛋白

l 人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基

實(shí)驗(yàn)方案 - Western Transfer （iBlot2 Dry Blot）

1. 打開 iBlot2 設(shè)備的蓋子。

2. 使用套件 #IB23001 （Thermo Fisher）解開頂部和底部堆棧的密封。將堆棧放在塑料托盤中。（一個(gè)托盤可以容納兩個(gè) 4-20% Tris-Gly 凝膠）

3. 將堆棧放在 iBlot2 轉(zhuǎn)印機(jī)上，確保堆棧中的電氣觸點(diǎn)與 iBlot2 系統(tǒng)左側(cè)的觸點(diǎn)對(duì)齊。

4. 小心地從包含頂部陰極部分的堆棧中取出頂部部分，并將其放在一邊。

5. 將預(yù)運(yùn)行凝膠放在轉(zhuǎn)印膜上，確保凝膠標(biāo)記物朝向您，并使用印跡輥去除所有氣泡。

6. 將預(yù)浸泡（在去離子水中）的 iBlot 濾紙放在預(yù)運(yùn)行凝膠上，并使用轉(zhuǎn)印輥去除氣泡。

7. 將陰極堆棧放在預(yù)浸泡的濾紙上，電極面朝上，凝膠面朝下。使用印跡輥去除氣泡。

8. 將吸收墊放在陰極堆棧的頂部，金屬觸點(diǎn)位于左側(cè)，確保其與系統(tǒng)接觸點(diǎn)對(duì)齊。

9. 蓋上蓋子。觸摸屏幕上的 P3，然后開始，它將運(yùn)行 7 分鐘。

10. 一旦 iBlot2 發(fā)出嗶嗶聲，表示循環(huán)完成，請(qǐng)打開 iBlot2 設(shè)備的蓋子。

11. 丟棄一次性海綿和陰極堆棧。

12. 小心地取下并丟棄濾紙。使用凝膠作為標(biāo)記，并使用剃須刀將轉(zhuǎn)移膜切成兩半。

13. 丟棄凝膠并從堆棧中取出轉(zhuǎn)印膜。取下膜進(jìn)行測試后，丟棄陽極堆棧。

14. 將膜在封閉溶液（所有抗體為 10% Seablock）中孵育 40 分鐘，在軌道振蕩器上輕輕攪拌。

15.在軌道振蕩器上的干凈托盤中用TBST（TBS，pH 7.2,0.1%TWEEN-20）洗滌膜三次;每次洗滌持續(xù) 5-10 分鐘。

16.將TBST中的探測（一）抗體稀釋至50ml的體積（約0.20μg/ml），并在室溫下將膜在抗體溶液中孵育1-4小時(shí)。（最佳孵育時(shí)間取決于抗體/抗原結(jié)合親和力，并且必須預(yù)先確定每種抗體。

17. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。

18. 根據(jù)制造商的規(guī)格稀釋 TBST 中的二抗。將膜在含有 50ml 稀釋二抗的干凈托盤中在室溫下在軌道振蕩器上孵育一小時(shí)。

19. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。

20. 顯色需要使用市售的（例如 Bio-Rad 或 Sigma）堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒。請(qǐng)按照制造商的說明進(jìn)行操作。

21. 條帶變得清晰可見后，將膜放入裝有 diH2O 的托盤中至少 10 分鐘，以停止顏色。

推薦材料：

SDS-PAGE 儀器及配件

iBlot2 干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)

iBlot2 NC 常規(guī)膜組

Seablock

1xTBST

抗原特異性探測抗體（一抗）

二抗（與堿性磷酸酶偶聯(lián)的驢抗探測抗體種類）

市售堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒

以下是Peporech公司熱銷產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱	貨號(hào)	規(guī)格
Human EGF	AF-100-15-100	100ug
Human IL-4	200-04-20	20ug
Human TNF-alpha	300-01A-10	10ug
Human FGF-basic	100-18B-50	50ug
Human IFN-gamma	300-02-100	100ug
Human IL-1alpha	200-01A-10	10ug
Murine GM-CSF	315-03-20	20ug
Human FGF-basic	100-18B-10	10ug
Murine M-CSF	315-02-10	10ug
Human GM-CSF	300-03-20	20ug
Murine IL-4	214-14-20	20ug
Human TNF-alpha	300-01A-50	50ug
Human TGF-β1 (HEK293 derived)	100-21-10	10ug
Murine IL-4	214-14-5	5ug
Human IFN-gamma	300-02-20	20ug
Human IL-2	200-02-50	50ug
Human TGF-β1 (HEK293 derived)	100-21-2	2ug
Human IL-2	200-02-10	10ug
Human IL-1beta	200-01B-10	10ug
Human IL-4	200-04-5	5ug
Human VEGF	100-20-10	10ug
Human IL-6	200-06-20	20ug
Murine GM-CSF	315-03-5	5ug
Murine IFN-gamma	315-05-20	20ug
Human EGF	AF-100-15-500	500ug
Human IL-6	200-06-5	5ug
Human IL-15	200-15-10	10ug
Human GM-CSF	300-03-5	5ug
Murine sRANK-Ligand	315-11-10	10ug
Human EGF	AF-100-15-1000	1000ug
Human HGF	100-39-10	10ug
Murine SCF	250-03-10	10ug
Murine EGF	315-09-100	100ug
Murine IL-6	216-16-10	10ug
Human IL-1beta	200-01B-2	2ug
Human SCF	300-07-10	10ug
Murine IL-3	213-13-10	10ug
Human M-CSF	300-25-10	10ug
Human VEGF	100-20-2	2ug
Human TGF-beta1-Produced in CHO	100-21C-10	10ug
Murine TNF-alpha	315-01A-5	5ug
Murine TNF-alpha	315-01A-20	20ug
Murine IL-2	212-12-20	20ug
Human IL-7	200-07-10	10ug
Murine WNT-3A	315-20-10	10ug
Human IL-21	200-21-10	10ug
Human FGF-basic	100-18B-100	100ug
Human IGF-I	100-11-100	100ug
Murine IL-2	212-12-5	5ug
Human/Murine/Rat BMP-2	120-02-10	10ug