AAT Bioquest  22804  Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*

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AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22804

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

該特定試劑盒旨在通過測量線粒體膜電位（MMP）的損失來檢測細(xì)胞凋亡。線粒體膜電位的崩潰與線粒體通透性過渡孔的打開相吻合，導(dǎo)致 xi胞se素C釋放到細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)而觸發(fā)凋亡級聯(lián)中的其他下游事件。我們的細(xì)胞計(jì)™橙色線粒體膜電位檢測試劑盒通過優(yōu)化的檢測方法提供所有必需的成分。該熒光測定使用我們專有的陽離子MitoLite™橙來檢測線粒體膜電位喪失的細(xì)胞凋亡。在正常細(xì)胞中，當(dāng)線粒體中積累MitoLite™橙色時，紅色熒光強(qiáng)度增加。然而，在凋亡細(xì)胞中，MitoLite™橙的熒光強(qiáng)度在MMP崩潰后降低。用MitoLite™橙色染色的細(xì)胞可以用流式細(xì)胞儀在488nm激發(fā)下以紅色發(fā)射（FL2通道）觀察。該試劑盒可與其他試劑一起使用，例如細(xì)胞計(jì)™磷脂酰絲an酸凋亡檢測試劑盒（22835），用于細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡的多參數(shù)研究。該試劑盒針對使用流式細(xì)胞儀篩選細(xì)胞凋亡激活劑和抑制劑進(jìn)行了優(yōu)化。

組件

組件 A：DMSO 中的 500X MitoTell Orange ™  1 瓶 （200 μL）

組分B：檢測緩沖液    1 瓶 （100 mL）

1.    用密度為 5 × 10 的測試化合物制備細(xì)胞⁵至 1 × 10⁶細(xì)胞/毫升

2.    將 2 μL 的 500X MitoTell™ 橙子加入 1 mL 細(xì)胞溶液中

3.    將細(xì)胞在37°C，5%CO中孵育2培養(yǎng)箱 15 - 30 分鐘

4.    沉淀細(xì)胞，并將細(xì)胞重懸于1 mL生長培養(yǎng)基中

5.    使用具有FL2通道的流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞

重要說明：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍所有試劑盒成分。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    對于每個樣品，在您選擇的 1 mL 溫?zé)崤囵B(yǎng)基或緩沖液中制備細(xì)胞，密度為 5×105至 1×106細(xì)胞/毫升。注意：應(yīng)單獨(dú)評估每個細(xì)胞系，以確定誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的最佳細(xì)胞密度。

2.    用測試化合物處理細(xì)胞一段時間以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并建立平行對照實(shí)驗(yàn)。

對于陰性對照：僅用載體處理細(xì)胞。

對于陽性對照：用FCCP或CCCP在5 oC，50%CO中以37-5μM處理細(xì)胞2培養(yǎng)箱15至30分鐘。注意：CCCP或FCCP可以與MitoTell™ Orange同時添加。為了獲得最佳結(jié)果，可能需要對每個單獨(dú)的細(xì)胞系滴定CCCP或FCCP。

3.    向處理過的細(xì)胞中加入 2 μL 500X MitoTell™ 橙（組分 A）。

4.    將細(xì)胞在37°C，5%CO中孵育2培養(yǎng)箱15至30分鐘。注意：對于貼壁細(xì)胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整，并在用MitoTell™橙染料負(fù)載溶液孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞一次。

5.    以 1000 rpm 離心細(xì)胞 4 分鐘，然后將細(xì)胞重新懸浮在 1 mL 檢測緩沖液（組分 B）或您選擇的緩沖液中。

6.    使用具有FL2通道的流式細(xì)胞儀（Ex / Em = 540 / 590 nm）監(jiān)測熒光強(qiáng)度。對感興趣的細(xì)胞進(jìn)行門控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購信息：

22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests